مطالعه مورفولوژیکی و مولکولی(با استفاده از ژن coii)کک های rattusهای تهران

کک ها یک راسته از حشرات هولومتابول شامل 2575 گونه که در 16 خانواده جای می گیرند، می باشند. کک ها نقش مهمی در انتقال بیماری هایی مانند طاعون و تیفوس موشی ایفا می کنند. علیرغم تاریخچه طولانی مطالعات گسترده روی طبقه بندی و بیولوژی کک ها، روابط فیلوژنی آنها هنوز ناشناخته مانده است. هدف این مطالعه، شناسایی مورفولوژیکی و مولکولی کک های جدا شده از rattus norvegicusهای صید شده از مناطق مختلف تهران بوده است. ratها با استفاده از تله های زنده گیر در دوره زمانی فروردین 88 تا بهمن 89 از 5 منطقه تهران صید شدند. مجموعه اکتوپارازیت های جمع آوری شده شامل: مایت، شپش و کک بود. از میان کلیه اکتوپارازیت ها، کک ها برای شناسایی با استفاده از کلید معتبر rothschild انتخاب شدند. دو گونه کک از دو جنس xenopsylla cheopis و nosopsyllus fasciatus با ایندکس بالای x. cheopis تشخیص داده شدند. ده کک از مناطق مختلف تهران به منظور استخراج dna با استفاده از پروتکل استاندارد ish-horwiz انتخاب شدند. سپس ژن coii برای تکثیر و تعیین توالی نمونه ها انتخاب شد، تا روابط خویشاوندی این کک ها را نشان دهد. الگوی dna میتوکندریایی با استفاده از پرایمرهای coii-f-leu و coii-r-lye و تکنیک pcr تکثیر شدند، سپس محصول pcr با الکتروفورز ژل آگارز آشکار و با استفاده از کیت، تخلیص شد. قطعات تعیین توالی شده که به شماره های دسترسی hq881588-97 در بانک ژن ثبت شد، با استفاده از برنامه chromas آنالیز شد. سپس هم ردیف سازی های چندگانه بین داده های حاضر با 37 توالی از 37 گونه موجود در بانک ژن با استفاده از برنامه mega5 انجام شد. در پایان، درختی تحت پارسیمونی رسم شد. آنالیز فیلوژنی این داده ها نشان داد که x. cheopisها یک شاخه خواهری با رابطه پلی تومی تشکیل دادند و n. fasciatus ها با هم و با بقیه cheopisها کلاد خواهری تشکیل دادند. همچنین مجموعه گونه های تحت مطالعه با گونه هایی از سه راسته diptera، siphonaptera و mecoptera با حمایت های مختلفی کلاد خواهری تشکیل دادند. داده ها و آنالیز آنها نشان داد که طبقه بندی کک ها در سطح جنس و گونه نیازمند تجدید نظر جدی است، تا تکامل آنها را بهتر نشان دهد. به علاوه احتمالا فیلوژنی مولکولی ماهیت هموپلازی بسیاری از خصوصیات مورفولوژیکی که طبقه بندی بر اساس آن انجام می شود را، آشکار خواهد کرد.